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    细胞活性氧(ROS)检测

    检测概述.png

    利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测 。DCFH-DA本身没有荧光 ,可以自由穿过细胞膜 ,进入细胞内后 ,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH 。而DCFH不能通透细胞膜 ,从而使探针很容易被装载到细胞内 。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF ,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平 。

    | 实验流程 

    Step1 :制成单细胞悬液(组织样本)

    Step2 :溶血(细胞样本无需进行此步骤)

    Step3 :离心去上清

    Step4 :调整细胞密度

    Step5 :加入相应的荧光探针

    Step6 :孵育

    Step7 :洗涤后离心去上清

    Step8 :上机检测

    | 实验费用  :根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价

    | 客户注意事项 

    1.标本收集与保存

    >> 组织样品 :新鲜组织放入液氮或-70度保存 ,组织不少于100mg(约绿豆大小);

    >> 培养细胞 :通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管 ,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂 ,混匀后保存于冰箱(-70℃ ,避免反复冻融);

    >> 血液细胞标本 :以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂 ,保存(-70℃可长期保存 ,避免反复冻融);

    >> 血清或细胞培养液标本 :离心去掉杂质后取上清入EP管 ,保存(以上4℃可保存15-20天 ,-70℃可长期保存 ,避免反复冻融) 。

    2.样本运输 :可选以下任何的一种方式寄送标本

    >> 组织样本 、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输;

    >> 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染 ,培养液不漏出 ,细胞不要长得太满 ,50%左右 ,灌满培养液);

    >> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出 ,视路途远近2-3天可到达) 。

    | 送检与交付标准 

    样品类型样品需求运输条件
    组织离体后组织制成单细胞悬液 ,加入PBS培养基内常温运输
    活细胞样本量 :1*106个细胞/TEST ,加入PBS培养基内常温运输
    血液将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内常温运输

    优势.png仪器.png客户.png检测流程.png送检流程.png

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